產品簡介：

通過黃嘌呤及黃嘌呤氧化酶反應系統產生超氧陰離子(O2-.)，O2-.可還原氮藍四唑生成藍色甲臜，后者在560nm處有吸收；SOD可清除O2-.，從而抑制了甲臜的形成；反應液藍色越深，說明SOD活性愈低，反之活性越高。

試驗中所需的儀器和試劑：

分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色/96孔板、研缽、冰和蒸餾水

產品內容：

提取液：100mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：5 mL×1瓶，4℃保存；   

試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存，用時加12mL雙蒸水，充分混勻，現配現用。

試劑三：液體100μL×1支，4℃保存。（臨用前100μL雙蒸水，充分混勻；）

試劑四：液體4mL×1瓶，4℃保存；

操作步驟：

一、樣品的前處理：   

(1) 細菌、細胞或組織樣品的制備：

   先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清，按照每500萬細菌或細胞加入1mL提取液，超聲波破碎（功率20%或200w。超聲3秒，間隔10秒。重復30次）。8000g 4℃離心10分鐘，取上清，置冰上待測。 

稱取約0.1g組織，加入1mL提取液進行冰浴勻漿； 8000g 4℃離心10分鐘，取上清，置冰上待測。

(2) 血清(漿)樣品：直接檢測

二、測定操作表：

1， 測定前將試劑一、二和四室溫放置，使試劑的溫度不低于室溫后再測定。

2， 試劑三為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。

3， 對照管只需要做一管。 

SOD活性計算：

1、抑制百分率的計算

抑制百分率＝( A 對照管－A 測定管) ÷A 對照管 × 100%

盡量使樣品的抑制百分率在30-70%范圍內。如果計算出來的抑制百分率小于30% 或大于70% ，則通常需要調整加樣量后重新測定。如果測定出來的抑制百分率偏高，則需適當稀釋樣品；如果測定出來的抑制百分率偏低，則需重新準備濃度比較高的待測樣品。

2、SOD酶活性單位：在上述黃嘌呤氧化酶藕聯反應體系中抑制百分率為50% 時，反應體系中的SOD酶活力定義為一個酶活力單位。   

3、SOD酶活性計算：

（1）血清（漿）SOD活性（U/ml）=[抑制百分率÷( 1－抑制百分率)×V反總] ÷V樣×樣本稀釋倍數=11.11×抑制百分率÷( 1－抑制百分率) ×樣本稀釋倍數

（2）組織、細菌或培養細胞SOD活力計算：

a，按樣本蛋白濃度計算

SOD活性（U/mg prot）=[抑制百分率÷( 1－抑制百分率)×V反總] ÷(V樣×Cpr)×樣本稀釋倍數=11.11×抑制百分率÷( 1－抑制百分率) ÷Cpr×樣本稀釋倍數。 

b，按樣本鮮重計算

SOD活性（U/g 鮮重） =[抑制百分率÷( 1－抑制百分率)×V反總] ÷(W×V樣÷V樣總)×樣本稀釋倍數=11.11×抑制百分率÷( 1－抑制百分率) ÷W×樣本稀釋倍數。

c，按細菌或細胞個數計算

SOD 活力（U/10⁴ cell）=[抑制百分率÷( 1－抑制百分率)×V反總] ÷(500×V樣÷V樣總)×樣本稀釋倍數=0.022×抑制百分率÷( 1－抑制百分率)×樣本稀釋倍數。

V反總：反應總體積，0.2ml；V樣：加入反應體系中的樣品體積，0.018ml；V樣總：加入提取液體積1ml；Cpr：蛋白樣本濃度，mg/ml; W:樣本質量，g； 500：細胞或細菌總數，500萬。