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產品名稱:酸性磷酸酶(ACP)測試盒

產品規格:50管/24樣,100管/48樣

產品貨號:YX-C-B001,YX-W-B001

產品報價:

免費咨詢:0551-66107970

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貨號

產品名稱

檢測方法

規格

售價(元)

YX-C-B001

酸性磷酸酶(ACP)測試盒組織及血液

可見分光光度法

50/24

140

YX-W-B001

酸性磷酸酶(ACP)測試盒組織及血液

微量法

100/48

270

組織及血液酸性磷酸酶(ACP)活性檢測試劑盒說明書(微量法

注意:正式測定前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

規格:100T/48S

產品內容:

提取液:液體 50mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 5mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑三:液體 15mL×1 瓶,4℃避光保存,變成藍綠色不能使用。

標準品:液體 1mL×1 支,1μmol/mL 酚標準液,4℃保存。

產品說明:

ACP 在酸性條件下催化磷酸單酯水解稱無機磷酸,常見于巨噬細胞的溶酶體內。ACP 常用于前列腺癌的輔助診斷。

在酸性環境中,ACP 催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚,苯酚與 4-氨基安替和鐵氰化鉀反應生成紅色亞醌衍生物,在 510nm 有特征光吸收;通過測定 510nm 吸光度增加速率,來計算 ACP 活性。

試驗中所需的儀器和試劑:

可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、冰和蒸餾水。

操作步驟:

一、粗酶液提?。?/span>

稱取約 0.1g 組織,加提取液 1mL 充分研磨,4℃、10000rpm 離心 10min,取上清液待測。

血液可直接用于測定,如果濃度高的話,用提取液稀釋。

二、測定步驟:

1.分光光度計/酶標儀預熱 30 min 以上,調節波長到 510 nm,蒸餾水調零。

2.試劑一置于 37℃水浴中預熱 30 min 以上。

試劑名稱(μL

測定管

對照管

空白管

標準管

蒸餾水

-

-

20

-

1μmol/mL 標準品

-

-

-

20

上清液

20

-

-

-

試劑一

40

40

40

40

試劑二

40

40

40

40

混勻后置于 37℃水浴中保溫 15min

試劑三

120

120

120

120

上清液

-

20

-

-

混勻后于 510 nm 測定吸光度,分別記為 A 測定管、A 對照管、A 空白管、A 標準管。

三、ACP 活性計算

1.按蛋白濃度計算

活性單位定義:37℃中每毫克蛋白每分鐘催化產生 1 μmol 酚。

ACP(U/mg prot)= [C 標準品×(A 測定管-A 對照管)÷(A 標準管-A 空白管)×V 樣]÷(Cpr×V 樣)÷T= (A 測定管-A 對照管)÷(A 標準管-A 空白管) ÷Cpr 

2.按樣本鮮重計算

活性單位定義:37℃中每克組織每分鐘催化產生 1 μmol 酚。

ACP 活力(U/g)= [C 標準品×(A 測定管-A 對照管)÷(A 標準管-A 空白管)×V 樣] ÷(W÷V 提取×V 樣)÷T=0.067×(A 測定管-A 對照管)÷(A 標準管-A 空白管)÷W 

3.血液中 ACP 活性計算

活性單位定義:37℃中每毫升血液每分鐘催化產生 1μmol 酚。

ACP 活力(U/mL)= [C 標準品×(A 測定管-A 對照管)÷(A 標準管-A 空白管)×V 樣] ÷V 樣÷T=0.067×(A 測定管-A 對照管)÷(A 標準管-A 空白管)

      C 標準品:1μmol/mL; V 樣:加入反應體系中上清液體積(mL),0.02mL;Cpr:樣品蛋白濃度,mg/mL;T:反應時間(min),15 min;V 提?。杭尤胩崛∫后w積,1mL;W:樣本鮮重,g。

注意事項:

1、 試劑一、試劑二和試劑三均需避光保存。

2、 試劑三變藍綠色后不能再使用。

3、 加入試劑三后必須立即混勻,否則顯色不完全。

4、 ACP 不穩定,尤其在 37℃和 pH 大于 7 的條件下活力喪失快,因此酸性磷酸酶樣品一般需當天準備;血清樣品中,每毫升血清中加入 10mg 檸檬酸氫二鈉或者 5mg 硫酸氫鈉,使 pH 降至 6.5 以下,或 5ml 血清加入 30%醋酸溶液 2~3 滴,置于 4℃可保存 1 周。


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